黏膜免疫是指动物机体在病原微生物刺激下,局部黏膜组织产生的一种免疫应答反应,是免疫系统的重要组成部分。它主要包括肠道和呼吸道黏膜免疫,对疫病防控起到重要的生理屏障作用。黏膜免疫具有独特的特性,不仅能在呼吸道黏膜表面产生肌注疫苗难以产生的免疫保护,还能在病原微生物侵入机体组织之前将其消灭,避免对机体造成损伤。黏膜免疫的免疫活动与黏膜本身的物理屏障共同构成了机体抵御疾病的‘第一道防线’。此外,黏膜免疫无需通过注射接种,可以避免因肌肉注射带来的局部不良反应。
在猪伪狂犬病的防控中,黏膜免疫发挥了关键作用。猪伪狂犬病毒主要通过空气和鼻腔接触传播,感染后会在上呼吸道的上皮细胞内复制增殖,进一步入侵扁桃体、肺及三叉神经,最终遍布全身及神经中枢,造成多种病理症状。传统的防控方法,如母源抗体和一般的免疫注射,只能在一定程度上限制野毒的复制,无法完全阻止其入侵。黏膜免疫通过使用活疫苗刺激呼吸道黏膜免疫系统,促使疫苗毒株进入神经细胞,实现‘占位效应’,从而抵抗野毒的感染入侵。目前,猪场多采用1-3日龄仔猪喷鼻免疫的方式激发黏膜免疫,为猪伪狂犬病净化打下坚实基础。研究显示,免疫时机与疫苗剂量对黏膜免疫效果影响显著,喷鼻器因其能将疫苗雾化分散,增加吸收面积,从而确保充分吸收,效果优于传统的注射器滴鼻。
国内猪伪狂犬病弱毒疫苗均为gE基因缺失疫苗,分为自然缺失和人工缺失两种。其中,TK基因是否缺失对疫苗效果有重要影响。研究表明,TK基因对伪狂犬病毒在神经组织细胞中的增殖、复制以及长期潜伏感染和病毒复活起关键作用。缺失TK基因的弱毒苗在三叉神经节的移植能力几乎消失。进一步实验表明,TK/gI/gE基因缺失可以有效降低病毒对神经细胞的侵染力,但中枢神经系统仍可能存在隐性感染。因此,保留TK基因的弱毒疫苗在三叉神经占位方面效果更佳,有利于1-3日龄仔猪喷鼻免疫,促进伪狂犬病的净化。
某猪伪狂犬阴性猪场进行了一项滴鼻‘占位效应’试验。选取初生仔猪5窝,每窝10头,共计5组。仔猪出生后第二天上午进行滴鼻免疫。滴鼻免疫后,通过免疫荧光定量技术和免疫组化方法评估疫苗的脑神经占位效应,并观察仔猪临床症状。结果显示,含TK基因的伪狂犬疫苗毒株C株占位效应优于TK基因缺失的疫苗毒株。使用含AD04佐剂稀释液滴鼻的效果也优于普通稀释液。综合来看,滴鼻免疫对比试验表明,猪伪狂犬病疫苗毒株TK基因的存在有助于病毒占位,C株疫苗的占位能力更强。
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