实验室假阳性的解决策略

在动物疫病的临床PCR检测中，我们经常遇到一个棘手的问题：检测结果与临床症状不一致，且在后续监测中未能复现这些结果。这种情况通常被归咎于实验室检测中的假阳性。那么，是什么导致了PCR检测的假阳性呢？

1、假阳性常见原因     

样本污染：在样本处理阶段，尤其是当样本量超过容器容量时，可能会溢出，导致实验室耗材和环境的污染。

耗材污染：在高阳性率的大环境下，检测过程中使用的耗材（如抗凝管，笔者曾遇到多次类似事件）可能被污染，从而引起假阳性结果。

阳性对照和标准物质污染：实验室频繁使用阳性对照和标准物质，可能会产生气溶胶，导致实验室环境污染。

PCR扩增产物污染：不当处理PCR扩增产物或PCR管密封性不佳，可能导致扩增产物以气溶胶形式扩散，污染实验室环境。

PCR试剂盒污染：在试剂盒的配制过程中，如果被阳性物质污染，或试剂盒本身存在非特异性反应，也可能导致假阳性。

此外，操作失误和仪器故障也可能导致假阳性结果。

2、应对假阳性的策略

规范的实验室设计：根据分子实验室的设计要求，合理划分配液区、样本处理区和扩增区，并设置适当的压差，以防止污染物外溢和实现实验室内部的单向流动。

物料抽检：在使用前，对物料进行抽检，确保其未被污染。

良好的实验室管理：规范使用阳性对照和标准物质，对于高浓度阳性对照，建议单独加样，并使用过滤吸头进行操作。

定期消毒：定期对实验室进行有效消毒。