前言
猪口腔液是指猪口腔中唾液和血清渗出液的混合液体。口腔液具有广泛的生物学功能,既可作为血清样品的替代品用于抗体检测,又可用于PCR抗原检测和病原分离。非洲猪瘟、猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征、口蹄疫、流感等病毒均可使用口腔液进行病原学检测。
口腔液采集
在兽医实验室检测工作中,检测对象的科学采样是前提。接下来和各位群友一起探讨常规采样中的猪口腔液采集!
采样方法 | 特点分析 | 适用采样对象 |
口咽拭子 | 优势:利于发现病毒感染或排毒早期的个体。 | ①限位栏猪只②异常猪只 |
弊端:采样过程容易造成污染,有一定操作难度,操作人员需具备极强的生物安全意识;适用于个别异常猪的采样,不适合大面积采样。 | ||
口腔液采集 | 优势:采样范围广,利于发现病毒感染或排毒早期的群体。 | ①大栏猪只②产房内仔猪 |
弊端:针对精神状态正常的群体采样,存在遗漏感染猪只的风险,且对样品检测时效性要求高。 |
标准采样必需物品套装
一次性隔离服、一次性PE手套、雨靴、一次性鞋套、一次性医用口罩、75%酒精消毒棉球、信息登记表、记号笔、冰袋、保温箱。
口腔液采样操作SOP
(一)物品准备
必需物品套装、无菌棉绳、核酸保护液、自封袋。
(二)具体步骤
1.准备工作:采样前根据采样目的制定方案规划好采样路线,带足所需物品,减少盲目走动。采样人穿戴好隔离服、口罩、雨靴,先佩戴一次性乳胶手套后,再戴一次性PE手套,以便及时更换;对道路、采样区域周边喷洒消毒剂后再采样;
2.将采样专用无菌棉绳一端打结挂到猪栏中猪只易接触处(须远离水咀和食槽),绳子下端距地面高度与猪肩胛骨同高,以便猪只能咬到棉绳;采样密度为每栏猪(15-20头)一根棉绳;
3.绳子悬挂时间建议为30分钟以上,最大程度确保同一栏中80%以上猪只咀嚼过棉绳;
4.摘取棉绳后,将棉绳装入自封袋密封(可事先存有1~2ml核酸保护液),取回;对走过的道路区域进行消毒药喷洒消毒。
5.记录送检:在自封袋表面做好信息记录,相应信息做好登记,冷藏保存尽快送检;
6.废物处理:每次采样后立即更换手套,避免交叉污染,废弃物品及时无害化处理;
7.消毒:采样后安排人员对采样路线的道路及周边区域进行消毒处理。
(三)注意事项
(1)根据猪群数量放置棉绳(15-20头/根),不可交叉;
(2)建议在上午饲喂前采样,或饲喂结束2小时后采集唾液,避免饲料残渣影响检测结果;
(3)收集口腔液前需观察棉绳湿润度,只有在充分湿润后方可收集;
(4)如果3小时内可检测,就无需加核酸保护液,若不能,则务必加入,送检过程避免反复冻融;
(5)唾液的收集在实验室或在偏僻的、易于消毒的地方进行,之后对分样区域进行消毒,禁止在猪舍内收集唾液,防止污染;
(6)如观察到个别发病猪精神萎靡,不会啃咬棉绳,可单独采集咽拭子/血拭子和接触的环境样本送检。
小结
相较其它采样技术,猪口腔液采集技术操作更简易、成本更低廉;对猪只无损伤,更加符合动物福利原则;一个样本可覆盖多个猪只、且可同时检测多种疫病的抗体和病原,减少人力物力的消耗,大幅提高疫病检测效率,能更加全面地掌握猪群的整体状况,适合大面积推广。
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