一例超详细的猪场蓝耳发病全过程分析

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本文亮点
01

1、完整的猪场蓝耳案例检测

2、既有ELISA抗体检测、也有中和抗体检测数据

3、病毒变化趋势

4、病毒复制动力学

5、传播链条

6、病毒中和试验

结论
01

本文报告了PRRSV如何在接种蓝耳疫苗的农场中持续存在的案例。引入新毒株后，经胎盘传播和高水平传播率导致产生病毒变异，但它同时会产生免疫或部分免疫的群体，出现病毒的低水平传播的状态。没有接触新病毒的亚群与无法诱导长期免疫力的毒株相结合，这可能会成为未来的主流毒株。本研究证明，管理者必须重视超级传播者和长期病毒血症动物的作用。

摘要
02

描述了一个免疫蓝耳疫苗的300头母猪场，在发生蓝耳之后的详细经过，重点研究了本次案例的感染、传播以及解决。选择了连续3个批次的仔猪，每批9-11窝；在爆发后的1.5个月、8个月、12个月后采样3批，采集仔猪2、4、6、9周龄仔猪。在疫情爆发后1.5个月，三分之一的母猪产下的仔猪受到感染，到9周龄时累计达到80%。但是在第二批采样仔猪只有10%感染。但是在第三批采样中，60%的窝数出现感染仔猪，累计达到78%。在第一批样品中发现了更多的毒株多样性，有4个病毒在传播，其中3个能够追溯到垂直传播时间。虽然在第3批只发现了1个变异毒株，但是这与其他的毒株并不一致，这表明猪场流行毒株已经发生了变化。从抗体角度来看，2周龄时第2批要比其他两批更高，而所有批次的仔猪或母猪中均检测到低水平的中和抗体。

此外，第1批和第3批的一些母猪分娩了两胎阳性仔猪，并且这些仔猪在2周龄时缺乏中和抗体。这表明病毒在初期爆发时高度多样性，随后是有限传播阶段，最后才发生变异，逃避猪群免疫系统，导致猪场蓝耳的垂直传播的反弹。尤其是那些发生垂直传播但是没有临床症状的母猪，可能会是猪场爆发的主要群体。

在整个案例的追溯过程中，大多数动物都会将感染传递给1-3头猪，与人类新冠病毒COVID-19初期发生类似，猪场也存在超级传播者。也有一只出生就存在病毒血症，但是也并没有发生传播的猪只。

结果—病毒在场内循环
03

第1批，总共为11窝，72头仔猪。出生时有4窝（约36.4%）检测到阳性（每窝平均1-5个阳性动物，CT值约30.8±4.0）。11窝中仅1窝仔猪的脐带检测结果疑似，但是在2周龄时也发现了被感染。在第一批的观察过程中，总共58只动物被感染，24只在9周龄前死亡，其中10例在2周龄前死亡。

第2批仔猪：病毒循环在第二批仔猪中表现较弱，74只动物只有8头表现出阳性，2只脐带检测阳性，另外在4周龄检测1只、6周龄检测2只、9周龄检测3只，这批的死亡率大概在21.6%。

第3批，出生时在6窝仔猪中检测出阳性，平均CT在35.6±1.0。在实验过程中，总共有55只动物感染，死亡率在18.6%。

结果—传播链
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在第1批次中，51例能够追溯到传播链，其中28例水平传播案例中的24例是来源于9头猪的感染；在第3批中，所有的可追溯的感染都来源于8例阳性猪。综合来看，大多数排毒动物都感染了临近的1-3头猪，但是在第1批中502号感染到8头，第3批中777号感染到4头。值得注意的是在第一批中有4头猪在出生时就检测到病毒血症，并且一直持续到实验结束，其中3头发生了感染，但是有1头并未发生传播。这头猪从出生到6周龄时都携带一种变异毒株，并且在9周龄时又携带了另一种变异毒株，这表明它被另一例感染猪携带的病毒感染。

结果—病毒复制动力学
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为了评估传播差异是否与病毒变体的复制能力有关，对每个进化枝的一个分离株进行了复制动力学检查。不同的进化枝在细胞培养中通常表现出相似的复制适应性。进化枝2的分离物可能显示出更高的早期传染性，这可能表明对病毒受体具有更高的亲和力。

结果—ELISA抗体
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当使用ELISA对2周龄、9周龄的血清样本的蓝耳抗体进行评价，S/P值表现出明显的差异。对2周龄仔猪而言，第一批的S/P值最高，第三批次之，第二批最低。在9周龄时，第1批和第3批的S/P值相近，但是第二批几乎都是阴性，这表明保育猪中的PRRSV传播受到限制。根据母猪胎次对第二批的2周龄仔猪的S/P值进行分析，结果发现小于6胎龄母猪的仔猪抗体水平更低。

结果—中和抗体和病毒中和试验
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排除掉出生时就已经感染的7头猪，大多数在整个观察期中和抗体都是阴性，只有1头在6周龄时检测为阳性。第二个检测组是在产房时被水平传播感染的16头仔猪，这两组中大多数动物中和抗体大多都表现为阴性，这似乎表示中和抗体水平与猪只感染状态并无关系。同样，2周龄的未感染动物也没有检测到相关的NAb滴度。此外，2周龄时的平均滴度与第1批和第3批比较无显著差异。此外，我们测定了在4周龄感染的仔猪在5周之后出现了中和抗体。在17例检测的动物当中，只有3例出现了能够对抗场内PRRSV的中和抗体。

此外，作者评估了在第一批和第三批取样的6头母猪的后代仔猪在2周龄时的中和抗体，以确定在接触场内的不同毒株后，母猪垂直传播给仔猪的中和抗体是否会随着时间而增加。在这6头母猪中，在第一批的1头产下受感染的仔猪，第二头是在第三批中生下了受感染仔猪，第三头在第一批和第三批中产下受感染仔猪。

在第一批这些母猪的后代中，在6窝中4窝发现了病毒中和测定方法VNT阳性，其中阳性窝中的21头仔猪中11头仔猪为阳性，滴度在2log2到5log2。在第三批检测的相同母猪中，只有2窝出现了阳性仔猪，12头仔猪中8头仔猪为阳性。值得注意的是，在第一批和第三批中，产下阳性仔猪的3头母猪中，有2头产下的后代VNT中检测为阴性。