非洲猪瘟与实验室检测

由于非洲猪瘟，现在大家都开始关注检测了，但是各种真真假假的信息把简单的事情复杂化了。从个人的角度谈谈非洲猪瘟的检测。检测成功有几个重要的要素:样品，方法，检测体系。

    1:关于样品:不同的样品在疫病发展的不同的时期，不同的样品类型(血液，组织，拭子，环境等），病毒的含量差异巨大。一方面我们可以通过文献获得，另一方面必须通过临床实践获得。对于活体采样，抗凝血是病毒出现较早，含量高和持续时间长的理想样本。现在大家都在讨论唾液，理想的样本应该是新鲜分泌的口腔液，两者有着本质的区别。口腔液检测的注意事项是，动物实验显示口腔液中病毒早一些，但是病毒含量也较低，对方法的灵敏度要求很高。

    2检测方法:对于非洲猪瘟病毒的检测荧光定量pcr方法是目前最稳定，最可靠，试剂成本(不是试剂盒）最低，全球最通用的方法。（荧光的最低检测限＜10个拷贝，等温扩增方法比荧光低约10倍，胶体金比等温低约5-10倍，ELISA和胶体金差不多，以上说的是目前市场上最好的产品）。关于OIE的非洲猪瘟荧光pcr方法，好像中国都选择性忽略，是因为商业利益还是技术领先呢？大家可以看看几个国外公司的验证报告，都要做与OIE方法的比较，你可以比oie的方法好，但是要证明到底好在哪里。个人觉得OIE的方法灵敏度是差了一点点，但是稳定性和特异性很好，可以检测所有基因型和在全世界权威参考实验室验证过，可靠性毋庸置疑。大家不要只盯着ct值，谁低谁就好吗（有些公司为了迎合客户已经想到了一些办法）？，谁循环数多就好？谁临界值高就好？按照OIE标准，检测方法的评价常用指标为分析敏感性（最低检测限），分析特异性（交叉反应），重复性，诊断敏感性特异性。好不好用数据说话。现在很多人讨论ct值是多少，都是基于各自的试剂盒和反应体系，换个实验室就没有参考价值了，这实在是很遗憾的。

     3检测体系:通常说的人机料法环，检测人员，检测仪器，检测试剂耗材，检测方法，检测实验室和质量控制体系等。我们现在只关注检测试剂盒，但是就算使用了合格的试剂盒，检测结果就准确吗？你的提取试剂合不合格，你的qPCR仪器合不合格，你的人员操作熟练不熟练，你的分子实验室有没有分区，实验中是否有质控？

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