近日,中国农科院上海兽医研究所、中国农科院生物安全研究中心等单位合作在《Emerg Microbes Infect》杂志刊文,对该团队基于ASFV-ΔI177L进一步删除基因获得的5基因缺失毒株(ASFV-GZΔI177LΔCD2vΔMGF)的效果评估进行了阐述。

他们在文章中表示,基于ASFV-ΔI177L的五基因缺失弱毒株在猪体内是完全减毒的,不能转化为带毒株,并能对带毒的亲代病毒的攻毒产生免疫。该弱毒株在安全性和免疫原性之间表现出良好的平衡,有可能成为控制非瘟的新的候选弱毒苗

ASFV-ΔI177毒株最早由美国梅岛实验室开发并且目前在越南开展商用。该疫苗有较低的在鼻腔内的脱落率以及其他一些问题,因此安全性需要进一步提高。选择恰当的目标基因进行进一步的删除,被认为是在兼顾保护效率的基础上提高安全性的有效方法。

该团队基于非洲猪瘟中国毒株GZ201801创造了三个弱毒株,分别是:ASFV-GZΔI177L,ASFV-GZΔI177LΔCD2v,和ASFV-GZΔI177LΔCD2vΔMGF。然后使用多项体外实验和体内实验来评估三个弱毒株的保护效率和安全性。

结果显示,这三种基因缺失的非瘟毒株能够在原代BMDM细胞中明显降低了病毒的复制能力。在体内评估中,断奶猪(35天大的仔猪,10-15公斤)肌肉接种这三种基因删除的非瘟毒株后,在28天的免疫观察期中存活下来。然而,接种ASFV-GZΔI177L或ASFV-GZΔI177LΔCD2v的猪只或多或少地出现了不良反应。接种ASFV-GZΔI177L的五头猪中有两头在免疫观察期结束时出现了轻微的关节肿胀,所有感染ASFV-GZΔI177L的猪在21-28dpi时表现出较高的病毒血症水平,正如Borca等人所报告的那样。接种ASFV-GZΔI177LΔCD2v的5头猪中有3头在攻毒后7-10天后也出现了轻微的关节肿胀,并随着时间的推移逐渐恶化。此外,其中一头接种ASFV-GZΔI177LΔCD2v的猪在攻毒后3-4天出现了短暂的发烧。

相比之下,接种ASFV-GZΔI177LΔCD2vΔMGF的猪在28天的观察期内没有出现上述的不良反应。最重要的是,当使用强毒力母株GZ201801攻毒时,它们受到保护。一些证据表明,ASFV-GZΔI177LΔCD2vΔMGF是一种高效的ASF疫苗候选物。首先,大多数接种ASFV-GZΔI177LΔCD2vΔMGF的猪显示出比接种ASFV-GZΔI177L和ASFV-GZΔI177LΔCD2v组的猪更低的病毒血症,并且在28天的免疫期内,病毒可以完全被清除。二是ASFV-GZΔI177LΔCD2vΔMGF具有良好的遗传稳定性,无论是在体外还是在体内连续传递。三是在免疫观察期间,ASFV-GZΔI177LΔCD2vΔMGF接种组没有发现病毒脱落。这是潜在的候选减毒活疫苗的一个理想特征。

研究者总结认为,他们所构建的五基因缺失非瘟毒株ASFV-GZΔI177LΔCD2vΔMGF(删除I177L,CD2v,MGF360-12L,MGF360-13L 和 MGF360-14L基因)在猪体内是完全减毒的,毒力返强的风险很低,并且保护猪只免受毒株亲本病毒的攻毒,是一个有前途的非洲猪瘟备选苗

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