明尼苏达大学的Valeria Lugo、Cesar Corzo和Sagar Goyal在本周的《科学》界面上比较了PRRSV在水中的存活率。

根据莫里森猪健康监测项目(MSHMP)的数据显示,美国养猪业每年都会面临猪繁殖与呼吸综合症的流行,大多数暴发在秋冬季节。据报道,大约40%有关MSHMP的种猪群报告都在粪肥抽送后15至30天内出现PRRS暴发(Vilalta 等,2021)。此外,还有结果表明,约10%的粪坑可能含有PRRSV的遗传物质(Montoya等,2020),并且病毒本身具有渗透能力(Alvarez-Norambuena等,2022)。因此,地下水的污染可能成为病毒传播的重要来源。此前很少有研究评估病毒在水和猪粪中的离体存活情况,主要是针对单一毒株和较低温度的存活情况(Pirtle和 Beran,1996;Ajariyakhajorn 等,1997;Dee等,2005)。

本研究的目的是确定不同PRRSV毒株在不同温度下自来水中的存活率。

材料与方法

将玻璃瓶中装满自来水,然后对其进行氯化和灭菌处理。使用30mg/L硫代硫酸钠进行脱氯,然后通过高压进行灭菌。四种PRRSV-2毒株(174 L1A、144 L1C、MN30100、VR2332)和一种PRRSV-1(Lelystad)在 Marc-145细胞中进行培养,滴度为104.5105.5 TCID50/0.1mL。为了制备样品,将0.75mL的每种病毒混悬液添加到四种不同处理方式的3.75mL自来水中。

通过TCID50微量滴定测定对等量样品中的初始病毒滴度进行定量。然后将等量样品置于不同的温度下,随着时间的推移进一步取样。在每个时间点,混匀并抽取0.5mL样品,并立即滴定。对于毒株、温度和水处理的每种组合进行三次重复。对数减少量通过公式log10 Ct/C0计算,其中Ct是指定采样时间的病毒滴度,C0是初始的病毒滴度。使用线性回归模型计算T99(病毒浓度减少99%的时间)。对病毒浓度降低率进行方差分析,并使用Tukey HSD检验进行成对比较。

结果
不同菌株和水处理条件下,通过 TCID50 微量滴定法(
101.254TCID50/0.1mL)检测出最低可检测滴度的时间为6-24小时(37°C);室温(21-23°C)下3-5天;且在4°C下保存超过35天。毒株VR2332的 T99 时间最长如下表。随着时间的推移,温度对病毒滴度降低率有显著影响(p<0.001)。然而,毒株和水处理并未发现具有统计学意义。成对比较表明37°C与室温(21-23°C)和4°C显著不同。

结论

温度对病毒的存活有显著影响,PRRSV在4°C的自来水中可长时间保持稳定。尽管未发现毒株和水处理具有统计显著性,但一些重要的条件包括不同毒株的不同起始滴度以及水处理的未测量的氯水平。此外,自来水可能无法代表现场条件。需要进一步的研究来证实这种环境在PRRSV传播中可能发挥的作用。

参考链接:https://umnswinenews.com/2024/03/15/comparative-survival-of-5-strains-of-prrsv-in-tap-water-at-3-different-temperatures/

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