非瘟检测，如何正确科学的采样？血检法VS唾液学检法

检测是非瘟防控中最重要的一环，但是采样的科学性、规范性不仅仅影响检测的结果，还可能影响到猪场的安危。

在非瘟防控过程中，唾液检测是防控非瘟的重要手段。

在自然感染状态下，非洲猪瘟病毒优先出现在唾液样本中，甚至从感染的当天就能从唾液/扁桃体当中开始出现病毒；而从感染到出现病毒血症需要较长的时间，有资料显示需要13-19天，甚至更长。若是以血液检测为防控非瘟的检测手段，已经贻误了时机，造成环境污染严重，定点清除已很难达到效果。

猪场要想对该病进行预防检测，最好进行唾液检测。血液检测用于疾病的确诊，若从血液检测到病毒，其污染面已经非常广了。

为什么要使用唾液检测？

血检法VS唾液学检法

1、采血检测方法需要人员进到猪场去抓猪，如果猪只携带病毒，人在采血过程中就起到了媒介作用，再去抓下一只猪时会将病毒进行二次传播，从而导致大面积的病毒污染。唾液检测法可避免。

2、口腔中病毒比血液中病毒种类更多，出现更早，唾液检测的检出率更高，漏检率更低。

3、采血会使猪产生恐惧应激，而唾液检测不存在这一方面问题，并且符合动物福利标准。

4、血检法具有滞后性，在早期控制传播和挽救损失方面效果欠佳。

目前大家已经公认的是，非洲猪瘟病毒的传播途径主要是唾液、血液、粪便3个方面，这也是非瘟爆发存在有三个阶段，分别为早、中、晚期。其中泔水传播被视为是早期阶段，因此非瘟病毒最先出现在唾液样本中。非瘟病毒从口腔进入，在口腔里繁殖造成局部感染，如果此时猪的抵抗力够强，就能在口腔中杀灭病毒，或者把病毒控制在局部感染，带毒但是不发病，这是早期阶段。

当病毒通过扁桃体进入血液形成了全身感染，动物会出现厌食、呕吐、出血、死亡等症状。对于想排查净化的猪场来说，当病毒存在于血液中时就已经处于晚期阶段了，此时进行采血检验就存在明显的滞后性！

相关研究发现，唾液中同样存在血液中含有的各种蛋白质成分、DNA、 RNA、脂肪酸以及各种微生物等，因此，通过唾液的检测来进行疾病的诊断是科学可行的。非瘟病毒的唾液检测原理就是如此，所以，唾液样的检测为优先必要措施，若贻误时机则形成病毒血症，环境污染严重，定点清除效果也将大打折扣。

唾液样本采集时需要注意如下几个问题：

1、为了保证样品具有足够高的病毒浓度，采样前必须停水停料至少2个小时，并且保证猪已经将唾液采集袋/绳完全咬透，否则实验室无法分离出唾液时只能加水稀释，病毒量过低的样本就会因为这个原因检测不到，出现假阴性的情况。

2、采样时一般是把唾液采集袋/绳固定在栏杆上，回收唾液采集袋/绳的时候，操作者一定要带上一次性手套；收集1份，更换1次手套，防止样本交叉污染。

3、无唾液采集袋/绳时，可用医用纱布+医用棉绳自行制作唾液采集袋；不可使用其他的可能含有荧光剂的布料、绳索，防止添加了荧光剂的布料和绳索干扰PCR的荧光采集，出现假阳性。

唾液采集袋

4、鼻拭子、咽拭子的采样操作者需要佩戴乳胶手套后再佩戴一次性PE手套，选用长度大于20cm的长棉签，采鼻腔液时建议两根干燥棉签同时采，棉签深入鼻腔或口腔，轻轻转动，彻底润湿后取出。采集后的棉签放入封口袋中。采集下一头时需更换PE手套。采集后的样本放入冰盒中，低温保存，尽快运输检测。