以下文章来源于恩睿康农业技术咨询 ,作者张建刚恩睿康农业技术咨询.恩睿康是由美国著名兽医师 Edgar Wayne Johnson(朱稳森)博士和乔清艳博士创办的一家专业化养猪咨询公司。目前提供养猪生产咨询,兽医咨询及人员培训服务。联系电话:13472127888,邮箱:all@pigs.ag
常规取样要求和材料
分子生物学样品可以选择取血液、唾液、肺、淋巴结、小肠等。微生物学样品可以选择取脑、肺、小肠等。病理组织样品可以选择取心、肝、脾、肺、肾、大脑、小脑、十二指肠、空肠、回肠、淋巴结,结肠。
材料:刀(不要用手术刀片)、剪刀、镊子、无菌保鲜袋、10%福尔马林溶液或者75%的酒精,打火机
可以用肺测各种病毒其中包括蓝耳、伪狂犬病毒等,同时要根据临床表现取肺做细菌培养,注意细菌培养的组织要取正常组织和病变组织交界处,并且最好选择没有经过治疗的猪。取固定组织的时候肺组织大小如右图(成人指甲盖大小),病理组织需要取尖叶、心叶、隔叶,位置点取三个以上
在不做详细的分子生物学,微生物等检测的时候,对肺的大体观察需要平铺,背面朝上,肺大体观察最重要的标志是要看肺能否塌陷褶皱,肺是否能够塌陷,可以大致衡量肺泡形态正常与否
取脑子做细菌培养或者病理组织,如果怀疑PRV可以用脑做PCR,如不需要做细菌培养和PCR的时候,只取固样品的时候,取样一定要包括大脑,用大脑可以观察是否存在化脓性脑炎或者非化脓性脑炎,这对于判断猪群当下的主要问题是什么会非常有意义
取心、肝、脾、肺、肾、淋巴结、淋巴结可以选择腹股沟淋巴结或者肺门淋巴结做为病理组织,这种组织的体积可以在成人指甲盖大小,取多种组织做组织病理学是必要的,尤其是在面临一些复杂的问题时候。在大多数情况下不需要取心脏、肝脏、脾脏、淋巴及、肾脏做细菌培养,在怀疑败血性沙门氏菌或者母猪诺维氏梭菌的时候可以用肝脏做培养
可以选择空肠或者回肠做PCR测病毒性肠炎,如流行性腹泻病毒、轮状病毒等,取空肠或者回肠长度在10厘米左右做肠道细菌培养,细菌培养的组织并不需要两头扎起来,取十二指肠、空肠、回肠每段1-2厘米左右做病理组织,怀疑沙门氏菌时候可以取结肠组织。病理组织需要冲洗肠道内容物,用75%的酒精或者福尔马林溶液进行清洗
猪腹泻相关疾病主要的病原分布和损伤特点
检测项目:
宏基因组测序
组织病理学
可以根据现场的实际情况选择各种合适的检查方式如分子生物学、微生物学、病理学检查。
正确的诊断方法是控制疾病的基础。诊断途径需要适当的采样,以分离或证明病原体,评估特征性显微镜病变以及观察的显微镜病变内特定抗原的共定位。
因此,诊断方法必须考虑病原体的生物学和生态学、检测病原体的解剖位置以及可用且适当的诊断工具,以证明病原体与患病状态之间的相关性。
在多数情况下,仅分离病原体并不意味着正确诊断,只有在严格遵循疾病定义的诊断标准才有可能得出准确的结论。
注意事项:
取样顺序先后为先取细菌培养组织,如(脑和肺、小肠),然后取PCR组织,如肺和小肠、最后取病理组织。
细菌培养的组织要单独放入无菌保鲜袋,如肺单独放进无菌保鲜袋,里面不能有其他组织,肠道需要取空肠或者回肠,不需要把整个肠道放入无菌保鲜袋。
病理组织中肠道需要用75%的酒精或者福尔马林溶液清洗肠道内容物,这点很重要,并且肠道组织不能太长,长度在1-2厘米。
解剖猪一定要取脑组织,特别是病理组织,细菌培养的组织要挑选那些近期没有经过治疗的。
解剖取样要两到三个人完成,其中一个人重点负责拍照,尤其对一些组织如肺、肠道必须要拍照,对组织的宏观病变的详细分析是非常必要的。
最佳的固定液为10%的福尔马林,如果现场没有福尔马林可以选择75%的酒精。
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