快收藏！猪流行性腹泻的系统诊断方法

来源：兽药圈

猪流行性腹泻（PED）是由猪流行性腹泻病毒（PEDV）引起的一种急性接触性肠道传染病，以水泻、呕吐和脱水为特征。我国于20世纪80年代初开始陆续有该病的流行，其中有30%～40%的病例与猪传染性胃肠炎（TGE）混合感染；2010年10月，东南亚多国出现新生仔猪病毒性腹泻，并波及我国南方10多个养猪大省，死亡仔猪超过100万头；2011年12月中旬起，该病在华东地区多家规模化猪场再次暴发；美国自2013年首次暴发此病后，2014年4月再次暴发且疫情迅速蔓延至墨西哥等国家。 近年来，该病已呈世界性分布，给养猪业造成了巨大的经济损失。



一、诊断方法 根据流行特点、临床症状和鉴别诊断做出初步判定，再进行病原学、血清学检测，结合PCR技术确定病原体。 1.流行特点。PED常年均可发生，以冬春季发病为重，我国多于每年11月至翌年4月流行此病。各种年龄的猪均易感，尤以哺乳仔猪最易感且病死率高。其中，哺乳仔猪、保育猪或育肥猪的发病率可达100%，母猪发病率15%～90%；7日龄以内仔猪越小，症状越重，发生腹泻后2～4天脱水死亡，死亡率高达70%～100%，7日龄以上仔猪持续3～4天腹泻后可能会死于脱水，死亡率为50%～90%；育肥猪死亡率为1%～3%；成年猪感染后一般经4～5天即可康复。 病猪是主要传染源，感染途径主要是粪—口途径。病毒存在于肠绒毛和肠系膜淋巴结中，随粪便排出后，污染饲料、饮水、衣服、鞋子、车辆及工具等而散播传染。根据感染毒株的毒力和猪的敏感程度不同，其潜伏期为：哺乳仔猪8～36小时，保育猪和育肥猪1～3天。发病顺序一般为：育肥猪—保育猪—妊娠母猪—产房母猪和哺乳仔猪。 2.临床症状。育肥猪、保育猪和母猪表现水样腹泻，粪便呈水泥浆样或黄色；保育猪消瘦，体表沾满稀粪，多扎堆取暖；产房母猪常出现乳房萎缩，奶水不足。 哺乳仔猪最早出生后12小时内就出现呕吐，随后开始腹泻，粪便呈黄、棕、白等色，脱水后畏寒，多数很快死亡；耐过猪一般成为僵猪或弱仔，表现为精神沉郁、眼睛无神、皮肤无弹性、生长缓慢且消瘦。 3.剖检病变。发病仔猪胃内充满未消化的乳糜，胃底黏膜可见不同程度的充血；小肠病变明显，肠管膨满扩张、肠壁透明，肠系膜充血、肠系膜淋巴结水肿；肠内充满大量黄色液体，呈水样或黏液样，有异味；肠绒毛萎缩变短，上皮细胞变性坏死和脱落；肾脏表面散布大量针尖状出血点，其他脏器无显著一致性病变；常见机理不明的背部肌肉坏死。 4.鉴别诊断。主要与猪瘟、传染性胃肠炎、轮状病毒病、伪狂犬病、博卡病、仔猪白痢、仔猪黄痢、仔猪红痢、副伤寒、猪痢疾、增生性肠病、等孢球虫病引起的腹泻相区别。 5.实验室诊断。 （1）PEDV快速诊断试纸条（初诊）。由韩国Ani-gen公司生产，操作简单，快捷。 （2）直接免疫荧光法。能快速、敏感、可靠地检测出样品中的病毒抗原。荧光显微镜检查判定：在胞浆中见到特异性苹果绿色荧光为阳性，无特异性荧光为阴性。 （3）RT—PCR或RT—nPCR检测。是一种快速、高度敏感、特异的诊断方法。应用外引物从病猪粪便中扩增出DNA片段，琼脂糖凝胶电泳分析为854bp的目的基因片段，可初步断定导致猪群发病的病原体中含有猪流行性腹泻病毒；进一步用内引物经嵌套式PCR扩增出的DNA片段，琼脂糖凝胶电泳分析为412bp的目的基因片段，可确定导致猪群发病的病原体为猪流行性腹泻病毒。


二、防控措施 1.疫苗紧急免疫。目前，我国大多数规模化猪场均采用正品的TGE－PED二联灭活疫苗进行后海穴（尾根与肛门正中的凹陷处）注射免疫（妊娠母猪产前20～30天每头接种4毫升，仔猪断奶前每头接种l毫升，25～50千克猪只每头接种2毫升，50千克以上猪只每头接种4毫升）；正在推广使用哈尔滨兽医研究所生产的TGE－PED二联弱毒苗和福建省生物药品厂同中国农业大学合作开发的TGE－PED－RV三联弱毒苗。韩国和日本等国家己使用商品化的PED活苗、灭活菌、口服苗以及仔猪口服的抗PED病毒的IgY抗体。 2.分类应急处理。 （1）哺乳仔猪。保温、保湿：产房可使用煤炉或其他供暖设施，确保产房温度适宜（20～25℃为宜），对仔猪保育箱使用大功率灯泡或红外线灯照射提高温度（30～34℃为宜）。产房内湿度控制在40%～80%。 腹腔补液：7日龄内重症仔猪一般无治疗价值，可取肠段做返饲用；7日龄及以上发病仔猪，可在5%的葡萄糖生理盐水中加入适量的抗生素（恩诺沙星等），预热至35℃左右进行腹腔注射（倒提仔猪，于倒数第2、3排乳头之间，距腹中线2～3厘米处进针，与腹壁成90度角刺入3厘米左右，刺破腹壁后感觉进针阻力消失，回抽无血液和腹腔内容物，即可注射药水)，每次30～50毫升，每天2～3次。 防止饥饿：当母乳不足或不愿吮乳时，可采用米汤或人工乳进行人工饲喂。 隔离饲养：若条件允许，可在猪场外设置隔离舍集中人工饲养治疗四周，以切断发病仔猪在场内的传播。 （2）保育猪及育肥猪。 适当限饲：尽量使用湿拌料，并将饲喂量降为正常量的三分之一。 防止脱水：在饮水中添加电解多维及口服补液盐，在静脉补液糖盐水中添加阿莫西林等抗生素，以提高其抵抗力并防止大肠杆菌或沙门氏菌等继发感染。 （3）后备母猪、妊娠母猪及哺乳母猪的返饲。返饲即采用新发腹泻哺乳仔猪的肠管、粪便等病毒携带物通过口服方式感染母猪群，使其通过自然感染的途径产生免疫力，新生仔猪通过母乳获得特异性母源抗体而获得保护。此法在商品化疫苗使用效果不佳，不能有效防控该病暴发流行时使用。与美国、加拿大等国家在蓝耳病暴发时，使用发病猪只的血清对全群猪进行同期感染的免疫机理基本相同。 返饲对象：对已经渡过隔离期，还没有纳入配种计划的后备母猪，可以进行返饲；60～95天的妊娠母猪，可以进行返饲，使其在分娩前产生免疫力。怀孕60天以内的母猪，返饲易出现流产。怀孕95天以后的母猪，返饲会使母猪进入产房后仍处于排毒期，导致仔猪一出生就感染病毒；哺乳母猪，需等到其断奶后再进行返饲；若返饲病料较少，应优先返饲后备猪和一胎猪，因为它们所生仔猪更易发生腹泻，死亡率也更高。 病料选择：主要为新发腹泻哺乳仔猪的肠管、内容物及粪便，发病24小时内采集病料为佳；其次为返饲后出现腹泻的母猪粪便，但应由兽医判定其不含伪狂犬病毒、博卡病毒等病原时方可使用，以防其他病原扩散。 病料处理：将1千克肠管用刀剁碎后，倒入2升市售生理盐水中，再加入300～500克奶粉和适量的抗生素（阿莫西林或青霉素+链霉素）制成返饲物，每天每头母猪食用1次，每次50克，连用3～5天，直至出现腹泻后停喂；产房内腹泻仔猪的粪便，应及时用卫生纸擦拭收集，尽快拌入饲料中供母猪食用，时间越短越好，最多不要超过4个小时。 效果评价：种猪胎龄及免疫情况不详的猪群，以后备群及一胎猪腹泻率﹥80%为返饲有效的标志；母猪胎龄3胎以内为主，腹泻率﹥70%；母猪胎龄3胎以上为主，腹泻率﹥40%，且群中后备猪及一胎猪腹泻率﹥80%；感染过PEDV的猪场，腹泻率一般为30%左右；猪群进行过多次疫苗免疫，其腹泻率与疫苗种类和免疫效果有关，需进行综合评价。其临床症状表现为，采食返饲后一周内出现发烧、腹泻、不采食或采食量下降。 注意事项：为确保返饲效果，避免病毒粒子被灭活，需注意如下六点：一是收集的病料尽量不要在阳光下照射，且需尽快处理使用；二是收集粪便时不要带猪消毒；三是返饲期间暂停饮水消毒；四是病料处理和拌食不要使用含有漂白粉等消毒剂的自来水（使用市售生理盐水）；五是返饲尽可能在10天内完成，若条件允许，应将怀孕60天以下和95天以上的母猪与返饲猪群隔离，以免残留返饲物通过料槽内饮水传播病毒；六是返饲期间应在饮水或饲料中添加适量的电解多维和抗生素。 还应严格落实消毒灭源及做好病尸粪污的无害化处理工作，减少人员车辆流动，提高生物安全水平等。