本研究从中国8个省份收集了80份重度呼吸道疾病(SRD)断奶仔猪血清样本、175份轻度呼吸道疾病(MRD)断奶仔猪血清样本、216份无症状断奶仔猪血清样本、35份腹泻型断奶仔猪血清样本和35份非腹泻型断奶仔猪血清样本,对PCV3进行流行病学调查。经qPCR检测,PCV3在各采样省份均有流行,总阳性率在1.04%—100%之间。有趣的是,SRD仔猪的PCV3阳性率(63.75%,51/80)显著高于MRD仔猪(13.14%,23/175)和无症状仔猪(1.85%,4/216)(P < 0.01)。腹泻型断奶仔猪PCV3阳性率(17.14%,6/35)显著高于非腹泻型断奶仔猪(2.86%,1/35)(P < 0.05)。此外,qPCR的Ct值在有呼吸道疾病和腹泻的断奶猪或育肥猪中比在无症状猪中低。序列分析表明,来自不同临床表现猪的PCV3序列之间存在较低的遗传多样性。
本研究进一步证明,PCV3在中国南部和北部的另外六个省份广泛传播,并且与先前报道的分离株具有高度相似性。作为一种新出现的猪病毒,虽然目前的病例对照研究表明,PCV3与猪的呼吸道疾病和腹泻有潜在的联系,但需要进一步研究其发病机制,以确定PCV3在猪健康中的作用。
猪圆环病毒是圆环病毒属的成员,有两个公认的种类,猪圆环病毒1型(PCV1)和猪圆环病毒2型(PCV2)。PCV1可以感染猪并在猪体内复制,但目前还未发现会引起任何明显的疾病。然而,PCV2感染会给全球养猪业造成重大的生产和经济损失。在临床上,PCV2可引起猪圆环病毒病(PCVD)或猪圆环病毒相关疾病(PCVAD),其特征为断奶后多系统性衰竭综合征(PMWS)、猪皮炎和肾病综合征(PDNS)、间质性肺炎和生殖障碍。
最近,在美国猪群中发现了一种明显不同于PCV1和PCV2的新型圆环病毒,暂时被命名为猪圆环病毒3型(PCV3)。新发现的PCV3全长基因组序列为2000个核苷酸,比PCV1和PCV2(分别为1760个和1780个核苷酸)大得多。事实上,在PCV3被发现之前,几年前在不同的养殖动物中也报道了类似PCV3的序列,这揭示了PCV3可能在动物物种中较早的分布。有趣的是,PCV3与PCV2相似,与猪的多系统性衰竭综合征、PDNS和繁殖失败有潜在的联系。目前,PCV3在中国、韩国和波兰也有报道,且分布广泛。尽管在PCV3流行病学方面取得了良好的进展,但不同临床表现(特别是无症状或腹泻)的猪中PCV3的流行状况尚未得到很好的确定。因此,本研究旨在对不同临床表现的猪进行PCV3的流行病学研究。
为进一步研究低Ct值(< 22)阳性样本的PCV3基因特征,分别从华南和华北地区获得具有代表性的PCV3-CHN/GD2016和PCV3-CHN/CC2016基因组序列,存入GenBank数据库,登录号KY421347-KY421348。与之前报道的PCV3序列一样,它们的基因组长度为2000个核苷酸。多序列比对结果显示,目前的两个PCV3基因组序列与其他已知PCV3序列的核苷酸相似性在 97%以上,表明PCV3分离株之间存在低水平的遗传变异。比对结果显示,两者主要差异在编码病毒衣壳蛋白的ORF2基因上(数据未显示)。系统发育分析显示,PCV3-CHN/GD2016和PCV3-CHN/CC2016与来自美国和韩国的PCV3分离株关系较近,与PCV1和PCV2关系较远(图3)。
先前的研究表明,PCV3在PDNS病例中很常见,它可能在美国猪群的繁殖障碍和多系统炎症中发挥作用。虽然也有其他猪病原体(包括猪细环病毒1型,TTSuV1;猪血凝性脑脊髓炎病毒,PHEV;猪星状病毒4,PAstV4)存在于PCV3感染的组织中,通过宏基因组测序获得大量的PCV3序列,提示PCV3可能在这些临床病例中发挥潜在的致病作用。同样,免疫组化在PCV2阴性的典型PDNS病变中发现了PCV3。中国最新的四项研究报告了临床病例中出现了单一PCV3感染或与PCV2混合感染。令人惊讶的是,在四项研究中的一项中,PCV3在生产失败的猪样本中具有异常高的阳性率(85.7%,12/14),而PCV2、PRRSV和PRV在这些猪样本中均为阴性。在这项研究中,我们在SRD猪中发现了PCV3与PRRSV的混合感染,而不是在其他猪中。已经证实猪同时感染PCV2和PRRSV会加重疾病的严重程度。PCV3和PRRSV或PCV2混合感染与疾病严重程度之间可能的协同作用值得进一步研究。此外,PCV3在病猪中Ct值较低(图2b),这表明PCV3的高滴度可能有助于猪临床疾病的发生。另一个有趣的发现是在粪便样本中检测到PCV3,这表明PCV3可能通过粪口传播。
总之,本研究进一步证明,PCV3在中国南部和北部的另外六个省份广泛传播,并且与先前报道的分离株具有高度相似性。作为一种新出现的猪病毒,虽然目前的病例对照研究表明,PCV3与猪的呼吸道疾病和腹泻有潜在的联系,但需要进一步研究其发病机制,以确定PCV3在猪健康中的作用。与PCV2相似,利用病毒感染性克隆结合临床和组织学方法可以解决这一科学问题。
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