当前我国养猪行业面临的疾病因素复杂多变,猪场疫病防控工作越来越棘手,兽医实验室检测技术逐步发展成为猪场疫病防控的“天眼”,为健康养猪及公共食品安全提供坚实保障。血清抗体检测能够及早发现疫病信号,是猪场疫病防控的绝佳工具。血清质量的好坏,直接影响实验室抗体检测结果的准确性,甚至会影响防控措施的制定。因此,对于猪场兽医和技术员来说,掌握猪群抗体检测的科学采样要点十分必要。
图1. 襄阳正大动保中心实验室
(一)采血原则 明确采样目的,选择对象分群,保证采样数量,取样随机进行。以常规抗体检测为例,每年检测3-4次为宜,通常选取9个阶段采样,即公猪、妊娠前/中/后期母猪、哺乳母猪、保育4周和8周、育肥14周和20周。通常每个阶段采集5-10头(采样量依据猪群大小而定),后备猪按照10%-15%的比例采血检测。需要注意的是,个别猪场在采集血样时,为了降低检测成本,盲目减少血样数量,导致检测结果没有代表性,对疫病防控措施的制定指导意义不大,这种做法是得不偿失的。
(二)采血工具 通常选择一次性注射器或者真空采血管进行采血。由于猪只大小不同,前腔静脉的深浅不一样,要求使用不同规格的针头(见表1)。注射器规格通常选用5mL或10mL。
表1.不同阶段猪群适用的针头型号
(三)采血方法 掌握并选取正确的采血方法,可获得高质量的血清样本,同时可降低猪群的应激反应。采血时要使用油性记号笔做好样本标记,避免字迹模糊不清,样品编号应简洁明了。目前,临床上最常用的采血方法主要有前腔静脉采血和耳静脉采血。前腔静脉采血速度较快,血液的质量高且不易溶血,适合从仔猪到种猪的采血。前腔静脉以右侧采血为宜,采血时要根据猪只大小选择合适的部位(见图2)。
图2.前腔静脉采血的保定方式及采血部位
耳静脉采血适用于种猪或40公斤以上的中大猪,猪群应激相对较小。可以通过使用止血带(或橡皮筋、输液管)捆住耳根来凸显耳静脉,反复轻拍耳后皮肤可以帮助刺激静脉血管怒张。静脉穿刺是从不超过最大静脉的末梢开始进行,针头沿血管走向呈10°-15°进针,缓慢抽取血液。
(四)血清析出与分离 每份血样采集3-5mL为宜,采完血后室温倾斜放置30分钟到1小时,然后置于4℃冰箱暂存。注射器回拔预留出部分空间,更有利于血清的析出。如需快速分离,可借助离心机,3000转/分钟离心5分钟即可。
(五)血清保存 短期内检测的血清可置于2-7℃冷藏保存3-5天,长期保存应放在-20℃冷冻,并避免反复冻融;若不具备血清分离条件时,可将全血凝固样品保存在2-8℃,并在24小时内送检,一般不超过48小时。
(六)血清运输 血清样品送检时放入泡沫保温箱中运输,视气温情况和运输时间长短加入2-3个冰袋,最好在周围空隙内塞入塑料气泡膜或旧报纸固定,以减少运输途中的剧烈震荡和溶血情况发生,保证血清质量。将样品信息及猪场背景信息登记表(如送检单位名称、送检人、样品数量、检测项目、猪场最近免疫时间、免疫程序、猪群疫病发生情况等)填写完整,与样品一同送至实验室。
(七)其他注意事项 常规抗体检测应选健康群体采样,病猪单独采集;仔猪忌采同窝,应满足随机采样原则性和群体代表性。采血时间点最好选择在猪群进食前或进食后2小时进行,夏季高温季节应在早晚凉爽时间段进行,以减少应激。采血过程中做好个人防护工作,必须戴手套,并避免被猪只咬伤。
科学采样并获得优质血清是抗体检测结果准确的前提保障,充分挖掘检测结果中的有效信息能够为猪场创造更多的经济效益。面对日益复杂的疾病发展新形势,襄阳正大动保中心与时俱进、秉承“客户至上”的服务宗旨,以精湛的检测技能和“专业、严谨、高效”的服务理念为猪场的健康生产保驾护航。
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